藥典委“細菌 DNA 特征序列鑒定法”征求意見稿解析及儀器配置方案
發(fā)布時間：2018-12-10
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《2020版中國藥典》新增指導通則“細菌 DNA 特征序列鑒定法（征求意見稿”解析與儀器配置方案
指導通則信息
- 指導通則號：尚未公布
- 指導通則名稱：細菌 DNA 特征序列鑒定法
- 征求意見稿發(fā)布時間：2018年8月23日
- 公示單位：國家藥典委員會
檢測項目解析
指導通則前言：細菌DNA特征序列鑒定法系以特征核酸序列作為目標檢測物，
用于藥用原料、輔料、制藥用水、中間產(chǎn)品、終產(chǎn)品（制劑）、包裝材料和環(huán)境等藥
品全生命周期質量控制中細菌的鑒定。
指導通則正文“待檢菌測定”部分，共涉及七個流程：分離純化、核酸提取、核酸
擴增、核酸擴增產(chǎn)物的檢測、核酸擴增產(chǎn)物的純化、核酸測序、結果判定。其中，
在“核酸提取環(huán)節(jié)”質量測定部分，提出要求如下：
待檢菌提取的核酸質量應能滿足核酸擴增的要求。采用紫外分光光度法測定模板
DNA的濃度和純度，應能夠滿足后續(xù)測試的要求，核酸濃度不宜低于10ng/μL，
A260/A280比值宜在1.8~2.0之間。
在應用紫外分光光度法做核酸質量測定項目時，紫外分光光度計及附件配置要求如下：
1.常規(guī)紫外分光光度計
2.微量比色皿，容積一般在100μL左右，光程為10mm
3.核酸濃度梯度：1~5μmol/L（5~25μg/m L，堿基對13個，雙鏈）
儀器配置方案
根據(jù)指導通則解析內容，藥品生產(chǎn)企業(yè)可能會采購紫外分光光度計來應對新版藥
典的實施，推薦以下配置方案：
- 紫外可見分光光度計主機
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- 微量樣品池架
主要用途：配合微量比色皿使用，可以提高微量樣品的測量精度。
作用：微調樣品池位置，盡可能使測量光束大限度通過微量比色皿的通光孔，提高微量樣品的測量精度。
MH181-1 型微量樣品池架（適用于TU-18系列）
MH19-1 型微量池架（適用于TU-19系列）
- 微量比色皿
石英側開孔微量比色皿
名稱 | 規(guī)格 | 光程（mm） | 容積（mL） |
石英側開孔微量池 | MC02-5 | 5 | 0.020 |
石英側開孔微量池 | MC03-5 | 5 | 0.030 |
石英側開孔微量池 | MC05-5 | 5 | 0.050 |
石英側開孔微量池 | MC08-5 | 5 | 0.080 |
石英側開孔微量池 | MC04-10 | 10 | 0.040 |
石英側開孔微量池 | MC06-10 | 10 | 0.060 |
石英側開孔微量池 | MC10-10 | 10 | 0.100 |
石英側開孔微量池 | MC16-10 | 10 | 0.160 |
石英單側壁微量池
名稱 | 規(guī)格 | 光程（mm） | 容積（mL） |
石英單側壁微量池 | SM02-5 | 5 | 0.020 |
石英單側壁微量池 | SM03-5 | 5 | 0.030 |
石英單側壁微量池 | SM05-5 | 5 | 0.050 |
石英單側壁微量池 | SM08-5 | 5 | 0.080 |
石英單側壁微量池 | SM04-10 | 10 | 0.040 |
石英單側壁微量池 | SM06-10 | 10 | 0.060 |
石英單側壁微量池 | SM10-10 | 10 | 0.100 |
石英單側壁微量池 | SM16-10 | 10 | 0.160 |
